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上午或者是下午都可以打瑞白，可以在医生的建议根据自己的实际情况确定打针时间，因为打完瑞白后常见的副作用有发烧，浑身无力，以及骨痛等，所以为了减少瑞白副作用对日常生活的影响可以选择在晚上打。瑞白有一定的保胎作用，在试管婴儿移植后，适当使用瑞白可以促进胚胎着床，提高试管婴儿成功率。

瑞白有两种注射方式，皮下注射或者是静脉注射，注射时间可以根据自己的身体情况来选择，无论是上午、下午还是晚上都行，需要注意的就是打瑞白一定要在医生的指导下进行，不能随便使用，下面可以了解一下打瑞白的时间、方式以及注意事项：

1.打瑞白常见的副作用有肌肉酸痛，骨痛、腰痛、胸痛等，少见的还会出现食欲不振或肝脏异常的情况，所以为了防止瑞白的副作用对如上生活的影响，可以在下午或者晚上打；

2.瑞白可以选择皮下注射或者是静脉注射，皮下注射通常选择上臂区域或者肚皮进行相关注射；

3.注射时请核对药品名称，有瑞白和新瑞白，两者有区别，不能混淆，非必要情况不要私自注射。

ELISA样本制备指南及注意事项

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定义及介绍

ELISA（enzyme linked immunosorbent assay，酶联免疫吸附测定）是最基础的免疫学实验之一，其理论基础是抗原抗体的特异性反应。ELISA因其特异性强、灵敏度高、稳定性好而被广泛使用。ELISA试剂盒检测样品包括血清、血浆、细胞培养上清、灌洗液或尿液等生物样本，实验操作步骤并不繁琐，但实验完成后需要把样本检测结果OD值转化为浓度值，从而供下一步分析所用，因此样品的预处理对于后续数据处理和结果分析非常重要。

样本制备指南

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血清

全血样品于室温放置2小时或2-8℃过夜后于2-8℃，1000×g离心20min，取上清即可检测。收集血液的试管应为一次性的无内毒素试管。避免使用溶血，高血脂样品

2.血浆

抗凝剂推荐使用EDTA-Na

，样品采集后30min内于2-8℃，1000×g离心15min，取上清即可检测。

3组织匀浆/组织全蛋白

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用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎。最后将匀浆液于2-8℃，5000×g离心5-10min，取上清检测。

其余方法：在分析天平（AL204型）上，称量50-100mg组织样本。在样本中加入5倍质量体积的含1%PMSF的1×PBS缓冲液；并用小剪刀等工具将组织样本剪碎（尽可能小块）。注：1×PBS缓冲液使用前，需加入PMSF，现用现加，PMSF终浓度为1mM。打开超声破碎仪，将超声破碎仪的功率调至25%，超声时间2s，间隔时间5s，总时间2min。放入样本，冰上超声3min。视样本匀浆情况调整总时长。超声完成后，将样本放于4℃或冰上裂解30min。打开离心机，将转速调至12000×g；将样本放入离心机，离心10min，取上清，按需要分装，于-20℃贮存。注：留取20μL样本，用于后续BCA法测定样本蛋白含量。

组织匀浆液或组织全蛋白中的蛋白浓度对于检测实验的影响至关重要，建议样本蛋白浓度至少1mg/mL以上，较低浓度蛋白的组织匀浆液有可能导致ELISA检测失败。

4.细胞提取液

贴壁细胞

用冷的PBS轻轻清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g离心5min后收集细胞；

可直接离心收集。收集的细胞用冷的PBS洗涤3次。每10

个细胞中加入150-200μLPBS重悬(推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂；若含量很低可减少PBS的体积)并通过反复冻融或超声使细胞破碎。将提取液于2-8℃，1500×g离心10min，取上清检测。注：留取20μL样本，用于后续BCA测定。

其余方法：

对于

：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。以2百万细胞为例，在样本中加入100μL的含1%PMSF的1×PBS缓冲液，震荡混匀细胞，4℃或冰上裂解30min。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。必要时可以进行超声处理，超声步骤与组织样本相同。

对于

：离心收集细胞，以2×10

细胞为例，在样本中加入100μL的含1%PMSF的1×PBS缓冲液，震荡混匀细胞，4℃或冰上裂解30min。用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成（5-10）×10

细胞/管，然后再裂解。必要时可以进行超声处理，超声步骤与组织样本相同。注：1×PBS缓冲液使用前，需加入PMSF，现用现加，PMSF终浓度为1mM。打开离心机，将转速调至12000×g；将样本放入离心机，离心10min，取上清，按需要分装，于-20℃贮存。注：留取20μL样本，用于后续BCA法测定样本蛋白含量。

5.细胞培养上清或其他生物体液

收集液体后于2-8℃，1000×g离心20min，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。注：因细胞培养基中的胎牛血清影响或其他生物体液中杂蛋白的影响，不建议进行BCA法测定样本蛋白含量。

实验细节与注意事项

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收集血液应避免产生溶血现象。红细胞破碎，释放大量的过氧化物酶，会影响ELISA检测中的辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）的酶促反应，造成检测结果的不确定性。

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样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃(3个月内检测)，避免反复冻融。在检测前，冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物。室温混匀后使用。

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试剂盒检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围，建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度并通过预实验确定样本的实际浓度情况。如果样品中待测物浓度过高或过低，请对样本做适当的稀释或浓缩。

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检测样本的稀释推荐多步稀释法，常规稀释检测为血清/血浆检测稀释度为2倍、20倍、200倍；细胞上清稀释度为5倍、50倍、500倍；建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度。

对于稀释倍数比较大的检测样本，参考稀释方案如下：

稀释100倍：一步稀释。取5μL样本到495μL标准品/样本稀释液内，做100倍稀释；

稀释1000倍：两步稀释。取5μL样本到95μL标准品/样本稀释液内，做20倍稀释，再取5μL 20倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内，做50倍稀释，总共稀释1000倍；

稀释100000倍：三步稀释。取5μL样本到195μL标准品/样本稀释液内，做40倍稀释，再取5μL 40倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内，做50倍稀释，最后取5μL 2000倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内，做50倍稀释，总共稀释100000倍；

每步稀释时取液量不少于3μL，稀释倍数不超过100倍。每步稀释都需混合均匀，避免起泡。

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若所检样本不在说明书所列样本之中，建议做预实验验证其检测有效性。

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若使用化学裂解液制备组织匀浆或细胞提取液，由于引入某些化学物质会导致ELISA测值出现偏差。

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某些重组蛋白可能与试剂盒中捕获或检测抗体不匹配而出现不能检测的情况。

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对于组织匀浆、组织全蛋白、细胞提取液等蛋白提取样本，经BCA法测定样本蛋白含量后，建议进行蛋白浓度的统一化，避免因组织重量、细胞数、产物体积等因素造成的人为误差；例如，统一全部检测样本浓度为1-2mg/mL，进行后续的稀释和检测。

据2021年度《中国不孕不育调查报告》显示，我国目前的不孕不育率已从上世纪90年代末期的2.5%迅速攀升至现有的12.5%左右，总计患者人数近5000万人，这也说明在我国每八对夫妻之中就有一对存在不孕不育的问题。

因此，试管婴儿这一体外受精，胚胎移植技术成为了许多不能自然受孕患者唯一的希望，他们中的许多人正是通过试管婴儿这一技术终于成功孕育出属于自己的宝宝。

家住在吉林省通化市的陈玉君与孟宪晖夫妇就是他们其中的一员，两人在2011年结婚后一直都没有育有自己的孩子，在经过检查后医生建议他们选择通过试管婴儿受孕。

陈玉君与孟宪晖一家

在经历连续三次的失败之后，2017年他们终于迎来了自己的第一个宝宝，取名为陈孟泽。

然而这份喜悦并没有持续多久，就被一个突如其来的噩耗打破了。

2019年，刚刚过完两岁生日的陈孟泽被查出患有急性淋巴细胞白血病，一时之间整个家庭陷入了无尽的痛苦之中。

陈孟泽

历经三次失败，终迎喜讯>

出生于1987年的陈玉君与小她五岁的妻子孟宪晖是吉林省梅河口市的同乡。夫妻俩是在服装厂打工时相识的，由于同时老乡的缘故，两人感到十分亲切，经常一起吃饭彼此照料。

慢慢地，两人在不断地相处之中产生了感情，最终确定了恋爱关系。

2011年4月在见过双方父母后，两人领证结婚，一同迈入了婚姻的殿堂。

这对小夫妻还没有结婚的时候就一直在畅想未来的美好生活，他们希望自己能够尽快迎来爱情的结晶。

可是，结婚已经两年多了，妻子孟宪晖迟迟没有怀孕，夫妻俩开始怀疑自己是不是身体哪个方面有些缺陷所以一直没有生育。

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陈玉君

想到这里，夫妻俩赶忙去往当地著名的三甲医院沈阳204医院生殖中心进行诊断。

诊断结果显示，孟宪晖患有右侧输卵管堵塞，这也是造成孟宪晖一直无法怀孕的根本原因。

若是不及时治疗，即使后来怀孕也极有可能导致输卵管积水造成宫外孕。为了得到更好的治疗效果，夫妻二人跑遍了当地大大小小的医院寻求医治，但情况依旧没有什么好转。

后来在医生的建议之下，他们选择了试管婴儿这种方式受孕。

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孟宪晖为了怀孕，从2012年第一次进行试管手术之后，之后的四年时间里，前前后后一共接受过三次试管手术。可惜的是，这三次手术没有一次成功，全部以失败而告终。

孟宪晖

这期间，孟宪晖不仅身体越来越差，多次手术失败对于她的心理健康也造成了很大的伤害。不仅如此，夫妻二人也为此欠下了不少外债。

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陈玉君看着妻子身体状况大不如前，实在不忍心她再受这样的罪了，他一再劝说孟宪晖放弃试管手术，两个人没有孩子也能过得很好。

但孟宪晖不肯，她不希望自己与丈夫没有后代，说什么都要再坚持一段时间。

陈玉君看到妻子如此坚持，只好默默地支持妻子的决定，尽可能地为她分担一些痛苦。

试管婴儿手术费用较高，对于本不富裕的夫妻二人也是一笔不小的负担。

陈玉君

为了筹集之后的手术费用再加上看病方便，两人辞去了服装厂的工作一同前往沈阳打工。但是，没过多久不幸就接踵而来。

2014年年初，陈玉君的父亲时常感觉腹痛难耐，去往医院检查后发现已经处于胃癌晚期阶段，病情已经十分严重了，夫妻俩只好辞掉在沈阳的工作回到家乡照顾老人。

没过几个月，陈玉君父亲的病情极速恶化，癌细胞几乎已经扩散到了全身重要的器官之中，化疗也没有什么作用了。2014年年底，便离开了人世。

医院

陈玉君的母亲身体本就不好，在听闻丈夫病逝的消息后一病不起，偏瘫在床，生活难以自理。

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本来打算回到沈阳务工的小两口只好放弃这个打算，为了能够负担母亲每个月的医药费以及日常生活开支，他们在家附近找了一份工作，这样就可以时时刻刻陪伴在母亲身边了。

随着时间的流逝，孟宪晖想要孩子的愿望也日益强烈，她害怕自己年龄越大怀孕的希望也会更加渺茫，她向丈夫陈玉君提出希望能够再去接受一次试管婴儿手术。

这次手术过后，夫妻俩并没有抱着很大的期望，但喜讯却在他们毫无准备的情况下到来了。

孟宪晖

2016年4月，孟宪晖发现自己那段时间早起的时候总是感觉犯恶心，全身乏力没有什么精神，她开始怀疑自己是不是有了身孕。

于是，夫妻二人赶往去医院进行检查，果然，这次他们终于没有失望而归，孟宪晖真的怀孕了。

2017年1月16日，在前前后后花费15万元手术费，经历四次试管手术后，两人的第一个宝宝陈孟泽终于顺利诞生了。

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陈孟泽的诞生让一家人感觉如获至宝一般，毕竟这是陈孟两家第三代唯一的一员，对于这个来之不易的孩子，全家上上下下都十分重视，倾注了近乎所有的爱意来呵护这个幼小的生命。

陈孟泽

不幸再至，两岁儿子患癌>

由于陈玉君和孟宪晖夫妻二人一直忙于打工赚钱，还要时时刻刻照顾卧在病榻之上的陈玉君母亲，实在是没有过多的精力能够照顾好这个孩子。

因此，自打陈孟泽出生以来，他就一直住在姥姥姥爷家生活，由两位老人来照料。

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陈孟泽出生之后有些许的闹人，每当到了晚上要睡觉的时候就一直哭闹个不停，为了能让孩子安然入睡，孩子的姥姥只好时时刻刻抱着他，一刻都不敢放下来。

要是一从怀里放下来，小孟泽立马就清醒了，为了照顾小孟泽，姥姥几乎就没有好好休息过一天，但即便是这样孟泽的外婆也从未抱怨过一句。

虽然家里条件并不是那么好，但孟泽的姥姥姥爷从未亏待过这个孩子，他们想尽办法为孩子创造更好的生活条件。

陈孟泽

孩子喜欢什么就买什么，什么东西好就买什么，而对于自己他们可以说得上是十分抠门了，从不敢多花任何一分钱，有好吃的也会先紧着孟泽吃。就这样，在全家人的精心呵护之下，孟泽一直健健康康地成长。

可让他们没想到的是，孟泽在两岁的时候身体却出了大状况。2019年一月中旬的一天晚上，姥姥发现本不挑食的孟泽不愿意吃晚饭，腹部还稍微有些肿胀，她摸了摸孟泽的头发现孩子还有些发热。

年纪较小的孩子由于免疫力低下发烧也是常有的事，姥姥以为孟泽大概是有些受凉，赶紧喂他吃了一些退烧药。

可是两三个小时过去了，孟泽的烧一点也没有退，姥姥姥爷赶忙打电话通知了陈玉君与孟宪晖，抱着孩子去了医院。

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陈孟泽

孟泽在当地医院接受了长达一个星期的治疗后病情依旧没有什么好转，但做了那么多检查也没有找出病因所在。医生劝说陈玉君夫妇：

“孩子这样烧下去可不是个办法，你们赶紧带着孩子转院吧。”

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1月26日，在医生的建议之下，孟泽一家人连夜从老家梅河口市坐车来到位于长春市的吉林大学第一医院求医。医生在得知孟泽已经连续发烧一个多星期了，却又找不到原因，立马安排孟泽做了骨髓穿刺诊断术。

1月28日，刚刚过完两岁生日的陈孟泽被正式确诊为急性淋巴细胞白血病。听到这一消息后，全家人都泣不成声。

孟泽的母亲孟宪晖在听到后更是当场晕了过去，还不到30岁的年纪一夜之间就长出了不少白发，整个人都苍老了好几岁，他们无论如何都想不通一家人如此用心呵护的孩子怎么会得了白血病呢？

陈孟泽

他们赶往找到主治医师询问，孩子的病还有希望治愈吗，怎么样才能挽救这个生命危在旦夕的孩子呢？医生安慰他们：

“孩子的病情发现得比较及时，只要尽早进行治疗，治愈的可能性是非常大的。”

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与此同时，专家们经过多次研讨也为小孟泽制定了一套治疗方案，根据该治疗方案可知，小孟泽需要进行长达两年半的化疗，其中包括16个疗程。若是化疗效果比较理想的话，再做两三年的康复治疗，小孟泽的病情就能完全康复了。

一个新的问题再次困扰着这个陷入困境的家庭，做完一整套治疗疗程大概需要花费近百万元，这一高昂的治疗费用对于孟泽一家来说无疑是一笔天文数字。

但陈玉君与孟宪晖下定决心，无论如何他们都不能放弃这个来之不易的孩子。

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陈孟泽

卖房筹款，无奈将病母送养老院>

早些年间，陈玉君和孟宪晖夫妻二人为了治疗不孕不育进行了多次试管手术，前前后后就花费了高达20万元，再加上这几年间陈玉君的父母接连生病，家里也欠下了不少外债。

为了还清债务，陈玉君在工地找了一份工作，孟宪晖为了方便照顾陈母也在家门口的物业公司做服务员，在夫妻二人的共同努力之下，家里的财政状况好不容易有了一些好转。

如今，儿子陈孟泽

这一

生病，夫妻俩为了照顾孩子也纷纷辞去了工作没有了收入来源。陈玉君一家再一次陷入困顿的局面之中。

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陈孟泽还未正式接受化疗治疗，光是前期的各种费用就将夫妻俩以及双方父母的积蓄全部掏空了，家里能够借钱的亲朋好友也都早已借了个遍，实在是没有办法了。

陈孟泽

2019年6月，万般无奈之下，夫妻二人决定将老家的房子卖掉以此来筹措儿子的治疗费用。

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于是，孟宪晖与母亲留在长春照顾孩子陪伴治疗，孩子的父亲陈玉君则回到了梅河口卖房，顺便将偏瘫生活难以自理的陈母送去当地的疗养院治疗。

之前，陈玉君害怕身体不好的母亲承受不住孙子患病的打击，就一直以陈孟泽发烧是由急性肺炎引发的借口来搪塞母亲的询问。他也明白纸终究是保不住火的，老人早晚都会知道真实情况的。

陈孟泽

于是，他一回到家中，便将孩子的病情托盘而出：

“妈，其实孟泽得的是急性淋巴细胞白血病并不是肺炎，之前我怕您承受不住这样的打击，就一直没敢将实情告知给您。

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我这次回来是相同您商量两件事情：一是我想把这个房子卖掉，毕竟孩子后续还需要一大笔治疗费用：二是我想将您送去咱家附近的疗养院，现在我要打工，孩子的妈妈要照顾孩子，实在没有时间来照顾您，您身边也不能离开人。

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疗养院那边有专业的护工可以照看您，这样我在长春也可以放心了。”

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陈玉君的母亲听到孙子患癌的消息后，顿时倏然泪下，握着儿子的手说道：

“你别担心我，现在的当务之急是要治好我孙子的病啊。”

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陈玉君的母亲

在卖掉房子还完银行按揭贷款和安顿完母亲后，陈玉君带着剩余的15万元房款回到了长春，继续陪着儿子治病。

做完第一阶段的化疗就已经花费了近20万元的医疗费用，再加上孟泽奶奶入住疗养院和治疗偏瘫的医疗费用，不到半年时间，陈玉君卖房的钱就已经花的一干二净了。

为了维持孟泽后续的治疗费用，陈玉君在医院附近的工地找了一份工作，虽然工作强度大，但好在薪水不错，即使这样陈玉君也会抽出休息时间再去别的工地打一些散工。

孟泽年近七旬的姥爷孟洪也没有闲着，他在老家找了一份仓库巡夜的工作，每个月拿到薪水后的第一件事就是汇给女儿，拿去给外孙治病，

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陈孟泽

除了巨额医疗费带来的巨大压力外，孩子在化疗之中承受的痛苦也让夫妻俩揪心不已。绝大多数的化疗药物都会引起患者各种各样的不良反应，而这些不良反应对于免疫力相对较低的幼儿

则

更加显著。

除了常见的脱发、食欲不振、恶心呕吐等症状外，孟泽在接受化疗治疗过程之中还出现了渗出性心包炎、肝脏功能受损以及肺部感染等问题。

看着年幼的孩子承受这样的折磨，夫妻俩既心急但又无可奈何，他们只能每天默默祈祷希望孩子能够尽快战胜病魔，恢复健康。

如今，孟泽的16个化疗疗程也接近尾声，身体也有了不少好转，全家上下也在为他后续的治疗费用拼尽全力，毕竟孩子是他们唯一的希望。

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参考文献>

澎湃新闻：做三次试管手术都失败，意外怀孕让她惊喜，两年后却跪地祈祷